橡胶树(Hevea brasiliensis)是大戟科(Euphorbiaceae)多年生的木本植物，广泛栽培于世界热带地区，是商业化栽培面积最大的产胶作物，生产上主要的种植材料为芽接树，其经济寿命约30年^[1]。橡胶树是我国国防工业的重要战略物资，也是我省重要的经济作物^[2]。农业农村部以云南、海南和广东为重点划定天然橡胶生产保护区面积为1.2×10⁶ hm^2[3–4], 目前，我国橡胶产量达到8.0×10⁵ t以上，已跻身于世界第四大产胶国^[5]。

种子作为农业生产的关键材料，其生命体的活性、自身营养供应、保护结构的完整性，三者共同决定了种子的发芽、出苗和成苗能力^[6]。橡胶树种子既是培育实生苗或有性系材料，也是培育橡胶芽接苗的不可缺少的材料之一。许多研究者从橡胶树种子水分胁迫、旱害响应、种子脱水敏感性等对种子的萌发性及实生苗长势的影响进行了多方面的研究。宫丽丹等^[7]对4个品系橡胶树实生苗叶片及根系对水分胁迫的反应进行研究，结果表明种子对水分胁迫的抵御与适应能力为GT1 > PR107 > RRIM600 > PB86；王纪坤等^[8]对橡胶树GT1袋装实生苗旱害响应机制的研究表明，实生苗在干旱初期(1~3 d)表现出较强的抗旱调节能力，干旱3~5 d是补水关键期；闫兴富等^[9]通过对橡胶树种子对脱水的敏感性研究表明种子活力随着含水量的减少而下降。

沙子是不可再生资源，买沙难、成本高是困扰橡胶树育苗的一个难题。且土地资源越来越稀缺, 面对人们对农作物日益需求的增长与土地资源紧缺之间的矛盾，亟需一种新型的育苗技术来满足人们的需求。无土栽培最初起源于一些发达国家，现已有100多个国家涉及到无土栽培技术的应用与发展^[10]，我国于20世纪70年代开始研究水培技术, 起步阶段是由山东农业大学开展关于作物营养液育苗的研究，推广到花卉的水培^[11]。水培是无土栽培中的一种，通过营养液向植物根系输入养分、氧气以及水分的培育方法，在育苗期间可短期无需使用基质^[12]，且水培的根系具有“可视化”，有利于观测根系动态。水培技术广泛应用于培育蔬菜和花卉的整个生育期，目前蔬菜水培主要包括番茄(Lycopersicon esculentum)、黄瓜(Cucumis sativus)、生菜(Lactuca sativa)、小白菜(Brassica campestris)、辣椒(Capsicum annuum)等^[13–16]；观赏植物进行水培研究的有发财树(Pachira macrocarpa)、鹅掌柴(Schefflera octophylla)、桂花(Osmanthus fragrans)、茉莉(Jasminum sambac)、垂叶榕(Ficus benjamina)、常春藤(Hedera nepalensis)等^[17–19]。虽然橡胶树苗木繁育技术在水培领域中尚无研究报道，但可以通过利用水培技术代替橡胶树苗木沙培假植阶段进行研究探讨。本研究通过水培浸水、悬空和传统的沙培比较橡胶树实生苗第1蓬叶稳定时，苗木的生长势、生理指标及养分含量。旨在选择一种适合橡胶树种子培育方式来替代对沙子的依赖，且缩短橡胶苗移栽缓苗期，提高苗木成活率、壮苗指数，减少育苗成本，进一步提升橡胶苗木出圃质量。

试验于中国热带农业科学院橡胶研究所栽培保护性基地A点苗圃内。供试材料为橡胶树‘热研73397’种子。105孔育苗盘上口径35 mm、底部10 mm、外形540 mm×280 mm、深度40 mm，把底部剪断，以备根系往下生长。

采用同一批种子进行催芽，选取发芽良好的幼苗进行试验。试验设置3个处理：水培：以105孔的育苗盘固定种子，放置于装满水的盆上，进行供氧；悬空培育：以105孔的育苗盘固定种子，每个孔中放入纸巾达到保湿作用；沙培：种子在沙床上进行常规培育，作为本研究的对照。每个处理3个重复，每个重复100颗种子，待第1蓬叶稳定时, 每个重复选30株长势均匀的实生苗测定生长势, 其中每10株混合为1个样品，3个重复，用于测定生理指标和养分。

生长指标测定  选取物候期稳定的实生苗, 利用卷尺测量株高和根长；数显游标卡尺测量茎粗和根粗；叶面积仪测量叶片的大小；用万分之一天平称量根、茎、叶的干重；壮苗指数=(茎粗/株高+根干重/地上部干重)×全株干重。

生理生化指标测定  采用第1蓬叶稳定期的新鲜根、茎、叶。可溶性糖含量采用蒽酮比色法; MDA含量采用硫代巴比妥酸(TBA)法；Pro含量采用酸性茚三酮染色法；SOD活性采用氮蓝四唑法; 叶绿素和类胡萝卜素含量用分光光度法；根系活力采用氯化三苯基四氮唑(TTC)法^[20]。

氮、磷、钾含量测定  采用第1蓬叶稳定期的根、茎、叶干样，用H₂SO₄-H₂O₂消煮后进行养分测定，氮用靛酚蓝比色法测定，磷用钼锑抗比色法测定，钾用火焰光度计法测定^[21]。

试验数据采用WPS Office 2013和DPS6.50软件进行整理和统计分析，利用Duncan’s新复极差法进行方差分析和显著性比较。采用隶属函数法进行综合评价。U_(i)=(X_i-X_min)/(X_max-X_min), 式中, i表示某项指标，X_i为某项指标的测定值，X_max为某处理某项指标的最大值，X_min为某处理某项指标的最小值。

表 1可见，水培处理的株高、叶面积、根长显著高于悬空培育和沙培，悬空培育的株高显著高于沙培，悬空培育和沙培的叶面积无显著性差异，沙培的根长显著长于悬空培育；水培和沙培的茎粗无显著性差异，均极显著大于悬空处理，水培和沙培的实生苗壮苗指数无显著性差异，均显著高于悬空培育的含量，水培、悬空培育和沙培的根粗无显著性差异，水培和悬空培育的根冠比显著小于沙培的。

表 1(Table 1)

表 1 实生苗第1蓬叶的长势 Table 1 Growth vigor of first leaf whorl of seedlings 处理 Treatment 株高(cm) Height 茎粗(mm) Stem diameter 叶面积(mm2) Leaf area 根长(cm) Root length 根粗(mm) Root width 壮苗指数Strong seedling index 根冠比Root shoot ratio 水培Hydroponic culture 32.35a 3.77a 43.95a 16.95a 3.76a 8.77a 0.35b 悬空培育Airborne culture 22.56b 3.27b 23.25b 2.89c 3.85a 8.62a 0.41b 沙培Sand culture 19.50c 3.69a 20.74b 6.30b 4.11a 4.47b 0.60a 同列数据后不同字母表示差异显著(P < 0.05)。下同 Data followed different letters indicate significant differences at 0.05 level. The same below

表 1 实生苗第1蓬叶的长势 Table 1 Growth vigor of first leaf whorl of seedlings

从图 1可见，水培的根、茎、叶生物量均高于沙培和悬空培育的，其中水培的叶片和茎生物量均显著大于沙培和悬空培育，水培和沙培的根生物量没有显著差异，均显著大于悬空培育的。水培处理的生物量显著大于沙培和悬空培育，悬空培育显著小于沙培。

图 1(Fig. 1)

图 1 实生苗的生物量 Fig. 1 Biomass of seedlings

水培实生苗生长到第1蓬叶稳定时，其株高、茎粗、叶面积、根长的长势最佳，壮苗指数和生物量最高，其次为沙培的实生苗，悬空培育的苗长势较差。

橡胶树实生苗第1蓬叶稳定时的生理指标见表 2，水培实生苗根、茎、叶的可溶性糖、MDA、Pro含量最低，均显著低于沙培。茎的SOD活性显著低于沙培，叶和根的SOD活性与沙培无显著差异; 在叶片中，悬空培育的可溶性糖和Pro含量与沙培没有显著差异，MDA含量显著小于沙培，MDA含量和SOD活性显著低于沙培；在茎中，悬空培育的可溶性糖和Pro含量显著高于沙培，MDA含量显著低于沙培，SOD活性与沙培无显著差异；在根中，悬空培育可溶性糖与沙培无显著差异，MDA、Pro含量和SOD活性均高于沙培。

表 2(Table 2)

表 2 实生苗叶片、茎、根的生理指标 Table 2 Physiological indices of leaves, stems and roots of seedlings 部位 Part 处理 Treatment 可溶性糖(mg/g) Soluble sugar 丙二醛(µmol/L) Malonaldehyde 游离脯氨酸(mg/g) Free proline SOD (U/g) 根Root 水培Hydroponic culture 29.14±2.15b 3.85±0.29b 0.27±0.11c 22.31±2.10b 悬空培育Airborne culture 37.40±0.92a 5.12±0.21a 1.35±0.14a 29.82±1.64a 沙培Sand culture 39.17±4.80a 4.21±0.44ab 0.64±0.01b 22.68±0.81b 茎Stem 水培Hydroponic culture 29.38±2.02c 18.18±1.60b 0.24±0.11c 15.75±0.74b 悬空培育Airborne culture 45.78±0.65a 19.35±4.89b 1.13±0.20a 20.15±1.34a 沙培Sand culture 36.27±2.63b 24.94±2.29a 0.84±0.08b 20.72±0.74a 叶Leaf 水培Hydroponic culture 42.42±0.51b 6.86±0.26b 0.19±0.04b 16.25±1.37a 悬空培育Airborne culture 53.45±0.55a 6.33±0.29b 0.61±0.21a 13.23±1.34b 沙培Sand culture 52.78±4.49a 12.05±0.65a 0.68±0.12a 17.15±1.68a

表 2 实生苗叶片、茎、根的生理指标 Table 2 Physiological indices of leaves, stems and roots of seedlings

从图 2可见，悬空培育的根系活力显著性大于沙培，水培与沙培间无显著差异。

图 2(Fig. 2)

图 2 实生苗的根系活力 Fig. 2 Root vitality of seedlings

从图 3可见，叶片中的光合色素明显比茎中的含量高，水培和悬空培育的光合色素含量均比沙培的含量高，其中，在叶片中，水培的叶绿素a、叶绿素b、叶绿素和类胡萝卜素均显著高于沙培和悬空培育，沙培的含量最低；在茎中，悬空培育的叶绿素a、叶绿素b、叶绿素和类胡萝卜素最高，与水培无显著性差异，但显著高于沙培。

图 3(Fig. 3)

图 3 橡胶树实生苗叶片、茎的光合色素含量 Fig. 3 Contents of photosynthetic pigments in leaves and stems of seedlings

水培实生苗的可溶性糖、MDA、Pro的含量和SOD活性均较低，水培和悬空培育的光合色素含量及根系活力均高于沙培。

对橡胶树实生苗的根、茎、叶的养分进行分析，结果如图 4，沙培的实生苗各部分氮含量最高，其次为悬空培育，水培的含量最低。叶片中沙培的氮含量显著高于水培，与悬空培育没有显著性差异; 茎和根中，沙培的氮含量均显著高于悬空培育和水培，悬空培育氮含量均显著高于水培。叶片中沙培和悬空培育的磷含量无显著性差异，均显著高于水培；茎中沙培的磷含量显著高于水培，与悬空培育无显著性差异，悬空培育与水培没有显著性差异；根中水培、悬空培育、沙培的磷含量均无显著性差异。叶片中水培、悬空培育、沙培的钾含量无显著性差异；茎中沙培和水培的钾含量无显著性差异，均显著高于水培，说明种子在水培条件下，实生苗叶、茎、根氮和磷的含量最低，沙培的含量最高；而水培处理的实生苗根和茎中钾的含量较高，叶片中含量与悬空培育和沙培均没有显著性差异，悬空培育在叶、茎、根中钾的含量最低。

图 4(Fig. 4)

图 4 实生苗根、茎、叶的养分含量 Fig. 4 Contents of nutrient in leaves, stems and roots of seedlings

通过橡胶树实生苗的长势、根系活力、光合色素、生理指标及养分含量进行隶属函数综合评价(表 3)，综合排序为水培 > 悬空培育 > 沙培。水培的平均值为0.74，悬空培育的平均值为0.54，沙培的平均值为0.17。

表 3(Table 3)

表 3 实生苗的隶属函数值及综合评价结果 Table 3 Subordinate function value and comprehensive evaluation indexes of seedlings 处理 Treatment 隶属函数Membership function 平均 Mean 排名 Rank 长势 Growth vigor 根系活力 Root activity 光合色素 Photosynthetic pigment 生理指标 Physiological index 养分含量 Nutrient content 茎Stem 叶Leaf 根Root 茎Stem 叶Leaf 根Root 茎Stem 叶Leaf 水培Hydroponic culture 0.75 0.17 0.56 1.00 1.00 1.00 0.78 0.49 0.67 0.94 0.74 1 悬空培育Dangling culture 0.11 1.00 1.00 0.47 0.04 0.24 0.54 0.83 0.68 0.47 0.54 2 沙培Sand culture 0.58 0.00 0.00 0.00 0.58 0.23 0.02 0.27 0.01 0.00 0.17 3

表 3 实生苗的隶属函数值及综合评价结果 Table 3 Subordinate function value and comprehensive evaluation indexes of seedlings

橡胶树种子经过水培处理，恢复生长较快，抽芽时间比传统沙培早大约5~7 d，其地上部株高、茎粗、叶面积的长势最佳，壮苗指数和生物量的含量最高。植物根系生长具有向水性，水培的根系长度可达16.95 cm。悬空培育的根系只有2.89 cm，且需要每天进行浇水保湿，较费时费工，若不及时浇水，会导致苗木严重缺水状态，进而影响苗木长势。有研究表明毛竹(Phyllostachys edulis)实生苗水培条件下，磷浓度较低时，可促进实生苗根系长度及根系总表面积的增长，本研究中水培的橡胶树实生苗根系最长^[22]。因此水培处理促进橡胶树实生苗生长，是可以替代沙培的一种新型培育方式。悬空培育的实生苗长势较差，后续需通过利用较深的育苗盘进行悬空培育，选择保湿性强的材料，调控根系达到理想的根团。

可溶性糖、Pro为常见的渗透调节物质，而MDA是植物细胞膜脂过氧化程度最直观的反应，这些指标可从渗透调节层面反映植物的生理状况^[23]。Pro增加的原因是合成受刺激、氧化受抑和蛋白质合成受阻^[24]。随着盐、碱溶液浓度的增大，植物在逆境胁迫中遭受的伤害就越大，所以植物体内积累的MDA含量就越高^[25]。本研究中，种子经过水培处理, 根、茎及叶片中的可溶性糖、MDA、Pro含量最低，沙培和悬空培育的含量相对较高，说明这两个处理均受到不同程度的胁迫作用，导致体内的积累量增高。叶绿素是植物进行光合作用的物质基础，其含量可以反映植物的光合能力与生长情况^[26]，植物在水分胁迫下增加叶绿素含量，将增强其在逆境中的生存能力^[27]。类胡萝卜素是植物体中重要的抗氧化物质，在减轻和消除由干旱等逆境引发的活性氧伤害方面直接发挥作用，同时通过逆境激素ABA间接在植物抗旱中发挥作用^[28]。白志英等^[29]的研究表明，在水分胁迫下，小麦(Triticum aestivum)叶片类胡萝卜素含量明显下降。本研究中，水培和悬空培育的光合色素含量较高，说明水分充足增加了橡胶树实生苗的光合色素，促进苗木生长。

氮、磷、钾是植物生长发育所必须的大量营养元素。Newton等^[30]对夏栎(Quercus robur)和白桦(Betula platyphylla)的种子养分转移及与苗木生长的对应关系进行研究，认为种子内含氮、磷、钾元素在苗木生长初期均会发生转移，且不同养分元素转移速率不同，充分说明了苗木早期生长与种子养分供应密切相关。本研究中橡胶树实生苗生长至第1蓬叶稳定，吸收的养分全部来自种子，没有外源养分补给，且种子没有脱落，说明种子的养分足以让实生苗生长至第1蓬叶稳定，因此，本研究的橡胶实生苗的长势差异完全取决于不同培育方式。Milberg等^[31]的研究表明，即使在土壤肥力条件截然不同的土壤中，大粒种子树种[如哈克木属(Hakeas)]的苗木生物量并没有显著差异，说明足够大的种子自身的养分对幼苗的长势大于外源养分的供给。本研究使用的橡胶树种子大小基本一致，水培的实生苗长势最佳，但其根、茎、叶的氮磷钾含量最低。

橡胶树种子经过水培，实生苗长势显著优于传统的沙培，悬空培育的实生苗长势最弱。水培促进了实生苗的株高、茎粗、叶面积的生长，及根系的伸长，苗木的生物量和壮苗指数均表现为最优；由于水分充足可降低苗木在生长过程中的干旱胁迫, 实生苗茎、叶的光合色素含量较高；橡胶树种子在有限的养分中，水培方式有利于种子养分的转化和提高苗木的利用率，从而促进实生苗的生长。悬空培育保湿效果不佳，且主根较短，苗木长势较弱, 还需进一步完善方法。因此，水培方式可以替代沙培进行橡胶树种子催芽生长，不仅可加快橡胶树实生苗的生长速度，有效缩短育苗时间，且在今后的育苗过程可减少对沙子的使用量，为培育环境友好型的橡胶苗木奠定基础。