2022, Vol. 30
2. 福建省农业科学院, 福州 350003
2. Fujian Academy of Agricultural Sciences, Fuzhou 350003, China
蚕豆(Vicia faba)，别名兰花豆、胡豆、南豆等, 为豆科(Leguminosae)豌豆属一年生草本植物[1–2]。蚕豆大多数品种具有无限开花的习性，但多花不多实，其有效结荚数不足现蕾数的15%[3]，蚕豆开花后，营养需求增大，植株营养供应不足造成大量落花落荚现象，在生产过程中会对蚕豆进行疏花处理，保证蚕豆有效荚的营养供应，疏花过程中摘除的蚕豆花一般都直接舍弃在农田中，没有加以利用，对蚕豆花进行开发利用，将实现废弃资源的利用，创造出额外的经济价值，提高企业和农民的经济收入，具有重要的意义。
关于蚕豆化学成分的研究，前人报道种子中含有大豆皂苷I、大豆皂苷bg和赤豆皂苷IV等成分[4–5]; 蚕豆叶片中含有山柰酚-3-O-葡萄糖-7-O-鼠李糖苷[6]; 蚕豆地上部分含有10个由槲皮素和山奈酚皂苷组成的黄酮皂苷[7–8]；蚕豆种皮中含有6个原花青素低聚物[9]，8个儿茶素及其衍生物的单体和二聚体[10]。蚕豆种子提取物中的缩合单宁、蚕豆地上部分提取物中的多酚类化合物和蚕豆皮提取物中的原花青素具有良好的抗氧化活性[11–12]。此外蚕豆提取物还具有抑制人类肿瘤细胞株增殖[13]、链脲霉素诱导的糖尿病活性[14]和黄嘌呤氧化酶活性[7]等功效。
蚕豆花具有凉血止血、降血压、防癌抗癌等功效[15–16]，目前，关于蚕豆花的研究主要集中在花荚脱落[17]、形成过程[17–18]和功效成分[16, 19]等方面。郭向群等[16]报道蚕豆花中含有槲皮素和山奈酚等黄酮类化合物，郑开斌等[20]报道蚕豆花中含有左旋多巴，然而蚕豆花水提取液中是否含有其他种黄酮类、氨基酸类成分以及其他类型化学成分尚未明确，尚没有关于蚕豆花水提取物成分和功效作用方面的相关研究，使蚕豆花难以得到进一步开发利用。
UPLC-ESI-QTOF质谱联用技术目前已被广泛应用于化学成分的表征研究中[21–24]，UPLC具有检测速度快、灵敏度高、分离能力强的优点, QTOF具有分辨率高、分子量上限高、定性能力强等优点[25–26]。因此，本研究利用UPLC-ESI-QTOF质谱联用技术首次对蚕豆花水提取物中的化学成分进行分析鉴定，进一步测定其抗氧化活性，以阐明蚕豆花药效物质基础，为蚕豆花的应用提供科学依据。
1 材料和方法 1.1 试验材料和仪器蚕豆(Vicia faba)鲜花于2019年2月25日采自福建省连江县丹阳试验基地。
超高效液相色谱UPLC-TripleTOF串联飞行时间质谱仪(美国AB SCIEX公司)；Denver TP-214电子天平(丹佛仪器有限公司)；Centrifuge5804R离心机(Eppendorf公司)；T6新世纪紫外-可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司)。
1.2 样品制备称取5 kg蚕豆鲜花置于100 L蒸馏罐中，加入20 kg纯水，加热回流提取2 h，过滤，即得蚕豆花水提取物，待用。
1.3 UPLC-MS分析分别移取5 mL蚕豆花提取物样品，真空浓缩抽干，加入500 μL提取试剂(乙腈: 甲醇: 水=2:2:1)超声提取15 min，重复提取3次，提取物于4 ℃，1 200×g离心10 min，取上清液，真空抽干，用100 μL复溶液(乙腈: 水=1:1)复溶，得上机样品，待用。
色谱条件 色谱柱：BEH C18柱(100 mm× 2.1 mm, 1.7 μm)；柱温：45 ℃；流动相A：水(含0.1%甲酸)，流动相B：乙腈/异丙醇(含0.1%甲酸)= 1:1；梯度洗脱程序：0~3 min 5%~25% B；3~9 min 25%~95% B；9~13 min 95% B；13~13.1 min 95%~ 5% B, 并保持3 min；流速：0.40 mL/min，进样量：10 μL。
质谱条件 样品质谱信号采集采用正离子扫描模式，电喷雾毛细管电压：1.0 kV，进样电压：40 V, 碰撞电压：6 eV；离子源温度：120 ℃，去溶剂温度：500 ℃；载气流量：900 L/h；质量扫描范围：50~ 1 000 m/z，扫描时间：0.1 s，间隔时间：0.02 s。
1.4 抗氧化活性研究DPPH自由基清除能力测定 参照Baltrusaityte等[27]的方法，取蚕豆花提取物旋蒸抽干，用纯水配置成10、20、30、40、50 μg/mL蚕豆花提取物溶液。取蚕豆花提取物溶液和DPPH自由基溶液(39.40 μg/mL)等量混合均匀，静置30 min，测定混合液在517 nm波长下的吸光度，计算蚕豆花提取物溶液对DPPH自由基的清除率，每个样品重复3次。DPPH自由基的清除率=(1-A1/A2)×100%, 式中, A1为DPPH自由基与蚕豆花提取物混合溶液的吸光值；A2为DPPH自由基与纯水混合溶液的吸光值。
ABTS+自由基清除能力测定 参照管瑛等[28]的方法，取76 mg ABTS和13 mg过硫酸钾配置成20 mL溶液，室温下暗室静置反应16 h，将溶液稀释50倍后待用。取蚕豆花提取物溶液和ABTS+自由基溶液混合均匀，静置30 min，测定混合液在波长734 nm下的吸光值，计算蚕豆花提取物溶液对ABTS+自由基的清除率，每个样品重复3次。ABTS+自由基清除率=(1-A3/A4)×100%, 式中, A3为ABTS+自由基与蚕豆花提取物混合溶液的吸光值；A4为ABTS+自由基与纯水混合溶液的吸光值。
1.5 数据处理和分析UPLC-MS分析的原始数据经Progenesis QI (Waters Corporation, Milford, USA)代谢组学处理软件处理，最终得到1个保留时间、质荷比和峰强度的数据矩阵，再与HMDB数据库和Metlin数据库进行比对，根据得分进行筛选，阈值选择为60分，对代谢物质进行定性分析[29–30]。参照徐晓俞等[31]的方法，采用峰面积归一化法计算代谢物质的相对含量。采用Microsoft Excel 2003和SPSS 19.0软件进行数据分析。
2 结果和分析 2.1 提取物成分鉴定分析利用UPLC-ESI-QTOF质谱联用技术从蚕豆花水提取物中鉴定出178种化学成分(表 1)，总离子流图见图 1，其中相对含量0.01%以上的成分有107种, 相对含量0.1%以上的成分有66种(表 2)。
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表 1 蚕豆花水提取物化学成分的种类和相对含量 Table 1 Types and relative contents of chemical constituents of water extract from Vicia faba flowers |
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图 1 蚕豆花水提取物总离子流图 Fig. 1 Total ion current chromatogram of water extract from Vicia faba flower |
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表 2 蚕豆花水提取物的化学成分和相对含量 Table 2 Chemical constituents and relative contents of water extract from Vicia faba flowers |
化合物1 m/z 278.122 5 [M + H]+，分子量277，失去1分子果糖基(162)产生碎片116.086 5, 进一步失去NH3 (17)、HCOOH (46)，产生碎片53.068 1, 分子式C11H19NO7，结合文献[32]推测为N-(1-脱氧-1-果糖基)脯氨酸。
化合物2 m/z 294.154 0 [M + H]+，分子量293，失去1分子果糖基产生碎片132.036 9，进一步失去NH3、HCOOH，产生碎片69.046 2，分子式C12H23NO7，结合文献[32]推测为N-(1-脱氧-1-果糖基)亮氨酸。
化合物3 m/z 130.048 7 [M + H]+，分子量129，失去1分子HCOOH、NH3产生碎片84.050 0、113.088 6，分子式C5H7NO3，结合文献[33]推测为D-焦谷氨酸。
化合物4 m/z 289.138 6 [M + H-2H2O]+，分子量324，失去1分子半乳糖基(162)产生碎片127.061 4，分子式C12H24N2O8，结合HMDB数据库推测为半乳糖基羟基赖氨酸。
化合物5 m/z 326.122 1 [M + H-H2O]+，分子量343，失去1分子果糖基产生碎片164.081 1, 进一步失去NH3 (17)、HCOOH (46)，产生碎片101.013 8, 分子式C15H21NO8，结合文献[32]推测为N-(1-脱氧-1-果糖基)酪氨酸。
化合物6 m/z 203.137 7 [M + H]+，分子量202，失去1分子HCOOH、NH3产生碎片157.055 9、186.056 3，分子式C9H18N2O3，结合Metlin数据库推测为丙氨酰基-DL-亮氨酸。
化合物7 m/z 205.095 4 [M + H]+，分子量204, 失去1分子HCOOH、NH3产生碎片159.063 4、188.056 9，分子式C11H12N2O2，结合Metlin数据库推测为L-色氨酸。
化合物8 m/z 322.091 6 [M + H-H2O]+, 分子量339, 失去1分子葡萄糖基(162)产生碎片160.052 4, 分子式C15H19NO9，结合HMDB数据库推测为环多巴葡萄糖苷。
化合物9 m/z 257.053 9 [M + H]+，分子量256，失去1分子HCOOH、NH3产生碎片211.053 9、240.044 3，分子式C8H14N2O5，结合HMDB数据库推测为L-羟基脯氨酸。
化合物10 m/z 346.196 4 [M + H]+，分子量345，失去1分子HCOOH、NH3产生碎片300.138 1、329.095 9，分子式C15H27N3O6，结合Metlin数据库推测为亮氨酸-缬氨酸-天冬氨酸。
化合物11 m/z 290.170 2 [M + H]+，分子量289，失去1分子HCOOH、NH3产生碎片244.079 7、273.067 9，分子式C12H23N3O5，结合Metlin数据库推测为丝氨酸-亮氨酸-丙氨酸。
化合物12 m/z 346.196 5 [M + H]+，分子量345，失去1分子HCOOH、NH3产生碎片300.154 8、329.202 5，分子式C15H27N3O6，结合Metlin数据库推测为缬氨酸-亮氨酸-天冬氨酸。
化合物13 m/z 336.191 4 [M + CH3OH + H]+, 分子量303, 失去1分子HCOOH、NH3产生碎片290.067 8、319.043 9，分子式C16H21N3O3，结合Metlin数据库推测为缬氨酸-色氨酸。
化合物14 m/z 346.196 8 [M + H]+，分子量345，失去1分子HCOOH、NH3产生碎片300.082 7、329.074 7，分子式C15H27N3O6，结合Metlin数据库推测为缬氨酸-天冬氨酸-亮氨酸。
化合物15 m/z 330.237 7 [M + H]+，分子量329，失去1分子HCOOH、NH3产生碎片284.049 5、313.055 7，分子式C16H31N3O4，结合Metlin数据库推测为缬氨酸-亮氨酸-缬氨酸。
化合物16 m/z 332.216 9 [M + H]+，分子量331，失去1分子HCOOH、NH3产生碎片286.066 2、315.042 1，分子式C15H29N3O5，结合Metlin数据库推测为亮氨酸-丝氨酸-异亮氨酸。
化合物17 m/z 344.252 9 [M + H]+，分子量343，失去1分子HCOOH、NH3产生碎片298.052 0、327.059 5，分子式C17H33N3O4，结合Metlin数据库推测为缬氨酸-异亮氨酸-亮氨酸。
化合物18 m/z 336.190 6 [M + H]+，分子量335，失去1分子HCOOH、NH3产生碎片290.055 3、319.162 7，分子式C17H25N3O4，结合Metlin数据库推测为甘氨酸-苯丙氨酸-异亮氨酸。
化合物19 m/z 358.268 7 [M + H]+，分子量357，失去1分子HCOOH、NH3产生碎片312.097 6、341.187 1，分子式C18H35N3O4，结合Metlin数据库推测为异亮氨酸-亮氨酸-亮氨酸。
化合物20 m/z 426.237 5 [M + H]+，分子量425，失去1分子HCOOH、NH3产生碎片380.055 2、409.049 3，分子式C24H31N3O4，结合Metlin数据库推测为异亮氨酸-苯丙氨酸-苯丙氨酸。
2.1.2 萜类化合物化合物21 m/z 149.058 2 [M + H-H2O]+，分子量166，失去1分子HCOOH产生碎片103.101 2，分子式C9H12O4，结合HMDB数据库推测为京尼平酸。
化合物22 m/z 247.131 3 [M + H-H2O]+，分子量为264，失去1分子HCOOH产生碎片201.087 1, 分子式为C15H20O4，结合Metlin数据库推测为脱落酸。
化合物23 m/z 221.188 3 [M + H]+，分子量220, 失去1分子H2O (18)产生碎片203.103 7, 分子式C15H24O，结合Metlin数据库推测为石竹素。
化合物24 m/z 497.246 9 [M + Na]+，分子量474，失去1分子HCOOH产生碎片451.082 5，分子式C27H38O7，结合HMDB数据库推测为赤芝酸L。
2.1.3 黄酮类化合物黄酮苷类化合物易脱去糖基形成黄酮苷元，黄酮苷元和对应的黄酮类化合物裂解规律一样，即黄酮结构中的C环的C1与C2位和C3与C4位已发生RDA裂解反应，产生A环和B环2个碎片离子。
化合物25 m/z 611.160 5 [M + H]+，分子量610，失去1分子鼠李糖基(146)产生碎片465.238 2，继续失去1分子葡萄糖基产生碎片303.151 3，分子式C27H30O16，结合文献[34]推测为芦丁。
化合物26 m/z 433.111 9 [M + H]+，分子量432，失去1分子C4H8O4(120)产生碎片313.061 1, 继续失去1分子醛基产生碎片283.058 8，分子式C21H20O10，结合文献[35]推测为异牡荆素。
化合物27 m/z 465.101 9 [M + H]+，分子量464，失去1分子葡萄糖基产生碎片303.054 2，分子式C21H20O12，结合Metlin数据库推测为异懈皮苷。
化合物28 m/z 595.1648 [M + H]+，分子量为594，失去1分子脱氧己糖-己糖基(308)产生碎片287.055 4，分子式为C27H30O15，结合Metlin数据库推测为野黄芩素-7-新橘皮糖苷。
化合物29 m/z 287.053 4 [M + H]+，分子量286，失去1分子CO(28)产生碎片259.043 6，分子式C15H10O6，结合文献[32, 34]推测为山奈酚。
化合物30 m/z 449.106 8 [M + H]+，分子量448，失去1分子半乳糖基产生碎片287.055 2，分子式C21H20O11，结合Metlin数据库推测为山柰酚-3-α-D-半乳糖甙。
化合物31 m/z 271.058 6 [M + H]+，分子量270，失去2分子CO产生碎片215.081 2，分子式C15H10O5，结合文献[36]推测为高良姜素。
化合物32 m/z 491.117 2 [M + H]+，分子量490, 失去1分子乙酰基葡萄糖苷(204)产生碎片287.071 6, 分子式C23H22O12，结合Metlin数据库推测为矢车菊素-3-(6-乙酰葡糖苷)。
化合物33 m/z 479.114 3 [M + H]+，分子量478，失去1分子葡萄糖苷产生碎片317.009 9，分子式C22H22O12，结合Metlin数据库推测为矮牵牛素葡萄糖苷。
化合物34 m/z 303.048 7 [M + H]+，分子量302，C环1、3位RDA裂解产生碎片153.034 7, 分子式C15H10O7，结合文献[37]推测为槲皮素。
化合物35 m/z 401.122 1 [M + H-H2O]+，分子量418，失去1分子葡萄糖苷产生碎片239.139 7，分子式C21H22O9，结合文献[38]推测为新甘草苷。
2.1.4 脂肪醇类化合物化合物36 m/z 200.199 4 [M + CAN + H]+, 分子量158，失去1分子H2O产生碎片182.086 3, 分子式C10H22O，结合HMDB数据库推测为1-癸醇。
化合物37 m/z 228.230 9 [M + CAN + H]+, 分子量186，失去1分子H2O产生碎片210.072 3，分子式C12H26O，结合HMDB数据库推测为十二醇。
2.1.5 脂肪酸和有机酸类化合物化合物38 m/z 305.235 6 [M + H]+，分子量304，失去1分子HCOOH产生碎片259.082 1，分子式C16H32O5，结合Metlin数据库推测为紫胶桐酸。
化合物39 m/z 211.167 6 [M + H]+，分子量210, 失去1分子HCOOH产生碎片165.086 0, 分子式C13H22O2，结合Metlin数据库推测为7-十三炔酸。
化合物40 m/z 305.245 7 [M + H]+，分子量304，失去1分子HCOOH产生碎片259.023 6，分子式C20H32O2，结合Metlin数据库推测为5, 11, 14, 17-二十碳四烯酸。
化合物41 m/z 293.209 8 [M + H]+，分子量292，失去1分子HCOOH产生碎片247.226 8，分子式C18H28O3，结合Metlin数据库推测为12, 13S-环氧-9Z, 11, 15Z-十八碳三烯酸。
化合物42 m/z 311.220 1 [M + H]+，分子量310, 失去1分子HCOOH产生碎片265.219 3, 分子式C18H30O4，结合Metlin数据库推测为9-氧代-11-(3-戊基-2-环氧乙烷基)-10(E)-十一烯酸。
化合物43 m/z 383.278 6 [M + H-2H2O]+, 分子量418, 失去1分子HCOOH产生碎片337.231 5, 分子式C22H42O7，结合HMDB数据库推测为棕榈酰葡萄糖苷酸。
化合物44 m/z 295.225 7 [M + H-H2O]+，分子量312，失去1分子HCOOH产生碎片249.087 0，分子式C18H32O4，结合Metlin数据库推测为13-过氧羟基-9, 11-十八碳二烯酸。
化合物45 m/z 376.102 1 [M + CAN + Na]+，分子量312, 失去1分子HCOOH产生碎片330.061 8, 分子式C14H16O8，结合HMDB数据库推测为3, 4, 5-三羟基-6-[(2-苯乙酰基)氧基]氧烷-2-羧酸。
化合物46 m/z 537.2116 [M + 2Na-H]+，分子量492，失去1分子HCOOH产生碎片491.280 0，分子式C26H36O9，结合HMDB数据库推测为4-羟基视黄酸葡糖苷酸。
化合物47 m/z 309.204 7 [M + H-H2O]+，分子量326，失去1分子HCOOH产生碎片263.238 0，分子式C18H30O5，结合Metlin数据库推测为2, 3-丁炔-8-异构前列腺素。
化合物48 m/z 339.251 9 [M + H-H2O]+，分子量356，失去1分子HCOOH产生碎片293.0989，分子式C20H36O5，结合HMDB数据库推测为13, 14-二氢前列腺素。
2.1.6 生物碱类和其他类化合物化合物49 m/z 273.120 1 [2M + K]+，分子量117, 失去2分子HCOOH产生碎片181.072 3, 分子式C5H11NO2，结合HMDB数据库推测为5-氨基颉草酸。
化合物50 m/z 441.118 2 [M + CH3OH + H]+, 分子量408, 失去1分子环己胺盐(99)产生碎片342.077 5, 再失去1分子葡萄糖苷酸(194)产生碎片148.072 6, 分子式为C20H28N2O7，结合HMDB数据库推测为3-吲哚基-β-D-葡糖苷酸环己胺盐。
化合物51 m/z 374.143 8 [M + H-2H2O]+, 分子量409，失去1分子葡萄糖苷酸(194)产生碎片180.057 6，分子式C16H27NO11，结合HMDB数据库推测为软骨D-葡萄糖醛酸。
化合物52 m/z 206.043 2 [M + H]+，分子量205，失去1分子HCOOH产生碎片160.054 4，分子式C10H7NO4，结合Metlin数据库推测为4, 8-二羟基喹啉-2-甲酸。
化合物53 m/z 309.086 5 [M + H]+，分子量为308, 失去1分子羟基(17)产生碎片292.083 0, 再失去1分子NH3产生碎片275.085 6, 分子式C17H12N2O4, 结合Metlin数据库推测为酒渣碱。
化合物54 m/z 316.284 0 [M + H]+，分子量315，失去1分子羟基产生碎片299.285 5，再失去1分子NH3产生碎片282.271 4，分子式C18H37NO3，结合Metlin数据库推测为6-羟基鞘氨醇。
化合物55 m/z 462.339 9 [M + H]+，分子量为461，失去1分子半乳糖苷产生碎片300.383 8, 分子式C24H47NO7，结合Metlin数据库推测为神经鞘氨醇半乳糖苷。
化合物56 m/z 302.304 4 [M + H]+，分子量301, 失去1分子羟基产生碎片285.061 0, 再失去1分子NH3产生碎片268.043 4, 分子式C18H39NO2, 结合Metlin数据库推测为D-赤式-C18-二氢-D-神经鞘氨醇。
化合物57 m/z 708.489 4 [M + H-H2O]+，分子量725，失去1分子H2O产生碎片690.423 7, 分子式C43H67NO8，结合HMDB数据库推测为螺环内酯。
化合物58 m/z 490.363 3 [M + H-H2O]+，分子量507，失去1分子H2O产生碎片472.278 0，分子式C26H54NO6P，结合HMDB数据库推测为溶血磷脂。
化合物59 m/z 338.341 0 [M + H]+，分子量337，失去1分子C19H37 (265)产生碎片73.375 6, 再脱去CH2产生碎片59.364 0，分子式C26H54NO6P, 结合文献[39]推测为芥酸酰胺。
化合物60 m/z 328.138 7 [M + CAN + H]+, 分子量286，失去1分子H2O产生碎片310.269 9, 分子式C13H18O7，结合文献[40]推测为水杨甙。
化合物61 m/z 504.170 2 [M + CAN + H]+, 分子量462，失去1分子H2O产生碎片486.106 5, 分子式C17H28O13，结合HMDB数据库推测为海藻酸丙二醇酯。
化合物62 m/z 463.122 2 [M + K]+，分子量424，失去1分子H2O产生碎片445.129 4，分子式C20H24O10，结合HMDB数据库推测为芸香素。
化合物63 m/z 417.117 4 [M + H]+，分子量416，失去1分子H2O产生碎片399.110 3，分子式C21H20O9，结合Metlin数据库推测为13-二氢阿霉酮。
化合物64 m/z 235.167 5 [M + H]+，分子量234，失去1分子H2O产生碎片217.154 4，分子式C15H22O2，结合Metlin数据库推测为日齐醇。
化合物65 m/z 309.204 4 [M + H]+，分子量308，失去1分子H2O产生碎片291.187 3，分子式C18H28O4，结合Metlin数据库推测为Soraphen O。
化合物66 m/z 263.237 3 [M + H]+，分子量262, 失去1分子C3H6O (58)产生碎片205.220 8, 分子式C18H30O，结合文献[41]推测为法尼基丙酮。
提取物中相对含量较高的成分有野黄芩素-7-新橘皮糖苷(21.59%)、3-吲哚基-β-D-葡糖苷酸环己胺盐(12.36%)、螺环内脂E (10.25%)、芦丁(6.19%)、海藻酸丙二醇酯(3.46%)、山柰酚-3-α-D-半乳糖甙(3.41%)和4, 8-二羟基喹啉-2-甲酸(3.00%)等。
黄酮类和生物碱类成分是蚕豆花水提取物中相对含量最高的2类成分, 分别达到36.53%和34.33%, 黄酮类和生物碱类是蚕豆花水提取物的主要物质基础，对蚕豆花水的功效发挥具有重要作用。生物碱类成分有17种, 3-吲哚基-β-D-葡糖苷酸环己胺盐、螺环内脂E、4, 8-二羟基喹啉-2-甲酸、酒渣碱、6-羟基鞘氨醇和软骨素D-葡萄糖醛酸相对含量较高，分别为12.36%、10.25%、3.00%、2.91%、1.08%和1.05%; 黄酮类成分有16种，包括有2种花青素[矢车菊素-3-(6-乙酰葡糖苷)和芍药素-3-O-葡萄糖苷]，野黄芩素-7-新橘皮糖苷、芦丁、山柰酚-3-α-D-半乳糖甙和异牡荆素相对含量较高，分别为21.59%、6.19%、3.41%和2.21%。
本研究还检测到12种氨基酸和18种肽类成分, 总相对含量分别达3.67%和4.05%，主要包括色氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、丝氨酸、脯氨酸、甘氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、丙氨酸、苏氨酸和瓜氨酸等氨基酸成分。11种萜类成分，相对含量均小于1%，其中3种单萜类成分：京尼平酸、芳樟醇氧化物D 3-芹菜糖基(1-6)葡萄糖甙和L-紫苏醇；5种倍半萜类成分：脱落酸、5-O-甲基-melledonal、二氢猕猴桃内酯、石竹素和α-姜黄烯; 1种二萜类成分：水芹烯二聚物; 2种三萜类成分：赤芝酸L和安息香胶酸。9种脂肪酸成分, 12, 13S-环氧-9Z, 11, 15Z-十八碳三烯酸、棕榈酰葡萄糖苷酸、9-氧代-11-(3-戊基-2-环氧乙烷基)-10(E)-十一烯酸和紫胶桐酸相对含量较高, 分别为2.77%、1.87%、1.55%和1.16%。9种有机酸和3种脂肪醇成分，相对含量均小于1%。
2.2 抗氧化活性分析从图 2可见，蚕豆花水提取物对DPPH和ABTS+自由基的清除能力均高于维生素C，其IC50值分别为26.5和25.0 μg/mL，表明蚕豆花水提取物具有较强的DPPH和ABTS+自由基清除能力。
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图 2 蚕豆花水提取物DPPH和ABTS+自由基清除能力 Fig. 2 Scavenging ability to DPPH and ABTS+ radical of water extract from Vicia faba flower |
黄酮类化合物属植物次生代谢产物，是广泛存在于植物中具有功效活性的一类化合物，黄酮类化合物普遍具有良好的抗氧化、抑菌作用，能够防治血管疾病、调节动物激素水平和提高机体免疫力。蚕豆花水提取物中野黄芩素-7-新橘皮糖苷和山柰酚-3-α-D-半乳糖甙都以糖苷的形式存在，其中野黄芩素能通过抑制EGFR/ERK1/2通路的激活来抑制结肠癌发生发展[42]，同时具有抗炎镇痛[43]、活血化瘀和祛风除湿等功效；山柰酚具有良好的抗癌活性，能抑制肺癌、肝癌、结肠癌和卵巢癌等多种恶性肿瘤的发生发展，主要通过促使癌细胞内活性氧生成，诱导癌细胞发生线粒体途径凋亡来起到抗癌作用[44]，同时具有抗炎、抗氧化、抗菌、抗病毒等多种功效。芦丁具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤、抗病毒、预防和治疗心脑血管疾病等作用[45]；异牡荆素具有降血糖、抗菌、调节记忆、抑制α-葡萄糖苷酶、降血压和抗氧化等作用。
生物碱类化合物种类较多，具有多种药理活性。蚕豆花水提取物中酒渣碱具有抗HIV、抗菌和预防癌症等作用[46]；6-羟基鞘氨醇可以抑制结肠癌细胞的生长[47]；软骨素D-葡萄糖醛酸中葡醛酸是抗坏血酸的前体，葡醛酸参与糖代谢，其与冰乙酸内酯化形成葡醛内酯，葡醛内酯具有减肥、增强能量、抗衰老等功效，常用于功能性饮料、化妆品和食品等领域[48]。
本研究结果表明，蚕豆花水提取物还含有多种氨基酸类和萜类成分，具有较高的功效作用和营养价值。蚕豆花水提取物含有7种人类必需氨基酸: 色氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸和苏氨酸，氨基酸种类丰富，营养价值高。萜类化合物中京尼平酸具有抗氧化、抗应激等药理作用；芳樟醇氧化物是一种多香韵的香料，具有强烈的甜香、木香和花香[49]；二氢猕猴桃内酯是类胡萝卜素裂解产物之一[50]，具有木香和麝香气味[51]; 石竹素具有细胞修复和再生功能[52]；α-姜黄烯为姜黄类药物的主要活性成分[53]；赤芝酸L是药用真菌赤芝的主要成分之一[54]。
本研究利用UPLC-ESI-QTOF质谱联用技术从蚕豆花水提取物中鉴定出178种化学成分，相对含量大于0.01%的成分有107种，其中16种黄酮类和17种生物碱类成分, 相对含量分别为36.53%和34.33%, 是蚕豆花发挥功效的主要物质基础。蚕豆花水提取物具有较强的抗氧化能力，其清除DPPH和ABTS+自由基的IC50分别为26.5和25.0 μg/mL, 表明蚕豆花提取物具有丰富的药效成分和高抗氧化活性，在医药、保健品、功能食品和化妆品等领域具有良好的应用前景。
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