乐昌含笑(Michelia chapensis)又名南方白兰花、广东含笑、景烈含笑等，是华南地区优良的乡土阔叶树种，其材质优良、树干挺拔、花香四溢，可用于城市园林绿化，是营造风景林和生态公益林的主要树种，具有重要的经济价值和生态价值^[1]。对乐昌含笑的研究近十余年来进展较快，已在群落特征^[2]、种源家系选择^[3-4]、育苗和栽培技术^[5-6]、园林绿化^[7-8]等方面取得较大成果。近些年各地积极践行“绿水青山就是金山银山”的生态理念，包括乐昌含笑在内的一大批优良乡土阔叶树种得到大力推广应用，因而对其生物学特性的研究也受到重视^[9]。叶片是植物进行光合作用、蒸腾作用、气体交换功能的主要场所，也是植物感知外界光照、温度、水分等环境变化的重要器官^[10]。叶片的性状特征，不仅体现了其系统发生和遗传信息^[10]，还是植物内在生理行为的外在展示以及个体适应环境变化所形成的一种生存对策，对植物的基本行为和功能具有重要影响^{[9, 11]}。因此，对植物叶片性状的研究已成为当前植物生态学等领域的热点^[9]，但目前还尚未见关于乐昌含笑家系叶片形态特征的研究报道。本文通过对多年生乐昌含笑家系试验林中15个家系叶片形态特征和生长情况的调查测定，分析了不同家系的叶形态差异及其对植株生长的影响, 以期为乐昌含笑优良基因资源的挖掘和利用提供参考。

乐昌含笑家系试验林位于广东省肇庆市国有大坑山林场，北纬23°58'，东经112°10'，海拔高度120~200 m，坡度35°，年均温20.9℃，年均积温6 520.5℃，年均降水量1 770 mm，试验林土壤为黄岗岩成土，红壤，土层深1.1 m以上。2005年3月造林，株行距3 m×3 m，初植密度1 110 ind./hm², 4株小区，8次重复。

在广东省北部和江西省南部乐昌含笑自然分布区进行乐昌含笑优树选择，于2003年分单株(家系)采种，2004年培育容器苗，2005年造林。参试家系共15个，包括来自广东省乐昌县大源镇的乐大1、乐大6、乐大7家系，乐昌县九峰镇的乐九3、乐九4、乐九5、乐九7，乐昌县两江镇的乐两3A、乐两4、乐两6、乐两12、乐两14、乐两15、乐两16，以及来自南雄市帽子峰镇的帽子峰家系。

于2019年11月，测量参试家系所有重复的植株胸径和树高，然后从每个家系中选择3株胸径接近家系内群体平均值的植株，采集植株中下部侧枝中部的叶片，每株随机采集100片叶，要求叶形完整，叶色正常。叶片采集后放入封口袋中带回实验室。叶长指叶基部(不含叶柄)至叶尖的长度，叶宽指叶中部的宽度。采用Expression 11000XL (EPSON)扫描叶片后用万深LA-S叶面积分析系统获取叶形态参数指标。然后，所有叶片样品先105℃杀青30 min，再在85℃下烘至恒重，称量每片叶的干物质质量。树冠浓密度采用评分制：3分为浓密，2分为较浓密，1分为稀疏^[3]。

利用Microsoft Excel 2010和SAS 8.1软件进行数据的统计分析。表型变异系数CV=S/X，S为标准差, X为平均数^[12]；相对极差R'=R_i/R₀×100%，R_i为第i性状家系内极差，R₀为第i性状的家系间总体极差^[12]。

由家系间叶片形态指标多重比较结果(表 1)可知，除叶柄长宽比在家系间的差异较小外，其余6个叶形态指标在家系间存在较大差异，其中，来自乐昌九峰镇的4个家系叶长、叶长宽比的变异较大，分别为10.52~14.15 cm和2.35~3.14；来自乐昌两江镇的7个家系叶宽、叶面积、干物质质量的变异较大，分别为3.63~5.23 cm、34.04~56.75 cm²和0.19~0.38 g; 乐昌大源镇的3个家系的比叶面积变异较大, 为128.93~ 149.41。表明乐昌含笑叶片形态在不同来源地的家系间和同一来源地的家系间均存在明显差异。

表 1(Table 1)

表 1 乐昌含笑家系叶形态指标的多重比较 Table 1 Multiple comparison of leaf morphological indices of Michelia chapensis families 家系Family L (cm) W (cm) A (cm2) L/W PL/PW SLA (g/cm2) DW (g) 乐大1 Leda1 12.59±0.15bcd 4.81±0.07abc 50.97±1.37abc 2.64±0.03de 3.17±0.27b 149.41±1.52ab 0.34±0.01abcd 乐大6 Leda6 13.15±0.31ab 4.76±0.08abc 52.29±2.13abc 2.76±0.04c 2.99±0.19b 138.66±2.73b 0.39±0.02a 乐大7 Leda7 11.68±0.13cde 4.53±0.05bc 44.39±0.90cd 2.59±0.03e 2.59±0.20b 128.93±1.77c 0.35±0.01abc 乐九3 Lejiu3 13.54±0.23ab 4.32±0.07cd 47.47±1.53abcd 3.14±0.03a 2.93±0.11b 181.75±1.80a 0.26±0.01bcde 乐九4 Lejiu4 13.47±0.25ab 4.60±0.09bc 51.37±1.68abc 2.95±0.05b 3.24±0.26b 136.39±2.04b 0.38±0.02a 乐九5 Lejiu5 14.15±0.27a 5.05±0.07ab 60.49±2.01a 2.80±0.03c 3.09±0.03b 167.69±1.99ab 0.36±0.01ab 乐九7 Lejiu7 10.52±0.27e 4.49±0.10cd 41.13±1.56abcd 2.35±0.04g 2.87±0.15b 181.13±3.32a 0.23±0.01de 乐两4 Leliang4 10.92±0.15e 4.03±0.06de 39.20±0.97bcd 2.72±0.03cd 2.34±0.22b 159.36±2.97ab 0.25±0.01cde 乐两6 Leliang6 10.49±0.18e 4.49±0.07cd 39.42±1.18bcd 2.34±0.03g 3.54±0.24b 167.11±2.73ab 0.24±0.01de 乐两12 Leliang12 11.46±0.23de 4.30±0.10cd 43.15±1.59abcd 2.68±0.05cde 3.50±0.31b 163.81±2.86ab 0.27±0.01bcde 乐两14 Leliang14 13.18±0.26ab 4.71±0.07bc 50.31±1.64abc 2.80±0.03c 2.75±0.03b 132.61±1.14b 0.38±0.01a 乐两15 Leliang15 10.90±0.20e 3.63±0.06e 34.04±1.00d 3.01±0.03b 4.78±0.35a 187.24±3.41a 0.19±0.01e 乐两16 Leliang16 13.17±0.21ab 4.37±0.08cd 48.47±1.51abcd 3.03±0.04ab 3.03±0.11b 166.17±2.62ab 0.30±0.01abcd 乐两3A Leliang3A 12.91±0.24abc 5.23±0.09a 56.75±1.90ab 2.47±0.02f 2.90±0.27b 167.04±2.33ab 0.35±0.01abc 帽子峰Maozifeng 11.65±0.23cde 4.55±0.10cd 45.37±1.33abcd 2.59±0.05e 1.99±0.22b 153.78±5.38ab 0.30±0.01abcd 同列数据后不同字母表示差异显著(P < 0.05)。L: 长; W: 宽; A: 面积; PL/PW: 叶柄长宽比; SLA: 比叶面积; DW: 干物质质量。下表同。 Different letters within column indicate significant differences at 0.05 level. L: Length; W: Width; A: Area; PL/PW: Petiole length-width ratio; SLA: Specific leaf area; DW: Dry weight. The same is following Tables.

表 1 乐昌含笑家系叶形态指标的多重比较 Table 1 Multiple comparison of leaf morphological indices of Michelia chapensis families

乐昌含笑家系内叶片形态指标的变异系数不同(表 2)，以帽子峰的最大(23.55%)，乐九5的最小(12.63%)。叶片形态指标在不同家系间的变异系数也存在较大差异，为5.14%~25.50%，以叶柄长宽比的最小，叶干物质质量的最大。

表 2(Table 2)

表 2 乐昌含笑叶形态指标的变异系数(%) Table 2 Coefficient of variation of different families of Michelia chapensis 家系Family L W A L/W PL/PW SLA DW 平均Mean 乐大1 Leda1 8.15 10.92 18.94 7.73 6.61 7.19 19.93 19.07 乐大6 Leda6 15.88 11.48 27.57 9.75 4.00 13.34 32.28 22.04 乐大7 Leda7 8.17 8.39 14.31 7.18 5.25 9.73 15.25 17.47 乐九3 Lejiu3 11.88 10.99 22.81 7.78 2.30 7.00 25.88 16.23 乐九4 Lejiu4 12.80 13.63 22.82 10.95 5.55 10.48 27.67 22.13 乐九5 Lejiu5 12.53 9.31 21.76 7.95 5.97 7.77 23.11 12.63 乐九7 Lejiu7 16.11 13.66 23.96 10.15 3.85 11.59 30.68 20.00 乐两4 Leliang4 9.97 11.09 17.42 8.17 6.68 13.20 24.51 21.58 乐两6 Leliang6 11.92 10.51 20.60 8.99 4.26 11.19 23.68 19.16 乐两12 Leliang12 13.08 14.29 23.61 10.75 5.26 11.17 28.00 22.59 乐两14 Leliang14 13.44 10.77 22.29 7.43 7.42 5.92 24.14 13.06 乐两15 Leliang15 12.84 10.85 20.73 7.78 5.05 12.87 29.66 20.83 乐两16 Leliang16 10.78 12.21 21.12 9.38 2.69 10.71 25.24 16.30 乐两3A Leliang3A 13.11 12.82 23.69 6.26 6.18 9.86 28.77 22.96 帽子峰Maozifeng 11.94 13.74 17.64 11.86 6.05 21.01 23.63 23.55 平均Mean 12.17 11.64 21.28 8.81 5.14 10.87 25.50

表 2 乐昌含笑叶形态指标的变异系数(%) Table 2 Coefficient of variation of different families of Michelia chapensis

从表 3可知，除胸径在家系间有差异外，树高和树冠浓密度的差异不显著；但在家系内，3个指标的变异幅度均较大，分别为24.38%~42.55%、25.33%~39.88%和31.02%~44.41%。15个家系的平均胸径为9.76 cm、平均树高为7.71 m、树冠浓密度均值为1.61。乐九4、乐两12、乐两15、帽子峰4个家系生长较好，胸径为11.07~11.27 cm，树高为8.07~8.48 m，树冠浓密度为1.64~1.93；而乐大6、乐九7、乐两16、乐两6家系生长较差，胸径为8.11~8.94 cm，树高为6.35~7.42 m，树冠浓密度为1.45~1.67。表明乐昌含笑生长指标在家系间和家系内均存在较大变异，并以家系内的变异更明显。

表 3(Table 3)

表 3 乐昌含笑不同家系生长差异分析 Table 3 Variation of growth indices of Michelia chapensis families 家系Family DBH H CD树冠浓密度Crown density 平均Mean (cm) CV /% 平均Mean (cm) CV /% 平均Mean (cm) CV /% 乐大1 Leda1 10.04±0.52ab 24.38 8.14±0.44a 25.33 1.52±0.13a 39.48 乐大6 Leda6 8.11±0.69b 40.78 6.35±0.50a 37.55 1.52±0.14a 43.33 乐大7 Leda7 9.49±0.69ab 36.88 8.17±0.56a 34.78 1.46±0.10a 34.78 乐九3 Lejiu3 9.51±0.91ab 35.80 8.06±0.60a 35.80 1.50±0.14a 34.59 乐九4 Lejiu4 11.27±0.75a 34.37 8.46±0.50a 30.44 1.67±0.11a 33.52 乐九5 Lejiu5 10.05±0.76ab 37.13 8.02±0.51a 30.96 1.54±0.13a 42.68 乐九7 Lejiu7 8.48±0.60b 30.95 7.15±0.56a 33.96 1.58±0.16a 43.86 乐两4 Leliang4 9.45±0.68ab 34.73 7.20±0.60a 39.88 1.70±0.15a 41.45 乐两6 Leliang6 8.59±0.74ab 39.47 7.42±0.53a 32.89 1.67±0.14a 38.54 乐两12 Leliang12 11.25±0.65a 28.66 8.48±0.51a 29.94 1.88±0.12a 31.92 乐两14 Leliang14 9.50±0.84ab 42.55 7.30±0.54a 35.43 1.55±0.11a 32.98 乐两15 Leliang15 11.22±0.84ab 39.05 8.10±0.59a 37.62 1.93±0.12a 31.96 乐两16 Leliang16 8.94±0.74ab 38.81 6.90±0.53a 36.27 1.45±0.11a 35.04 乐两3A Leliang3A 9.37±0.74ab 38.00 7.78±0.57a 35.02 1.61±0.10a 31.02 帽子峰Maozifeng 11.07±0.77a 32.75 8.07±0.50a 28.87 1.64±0.15a 44.41 DBH: 胸径; H: 树高; CD: 树冠浓密度; CV: 变异系数。下表同。 DBH: Diameter at breast height; H: Tree height; CD: Crown density; CV: Coefficient of variation. The same is following Tables.

表 3 乐昌含笑不同家系生长差异分析 Table 3 Variation of growth indices of Michelia chapensis families

15个参试家系形态和生长指标的偏相关分析结果表明(表 4)，叶长与叶宽呈显著正相关，与叶长宽比和叶面积呈极显著正相关；叶宽与叶长宽比呈极显著负相关，与叶面积呈极显著正相关。叶干物质质量与叶面积呈显著正相关，与比叶面积呈极显著负相关。由此可见，7个叶片形态指标与树冠浓密度、胸径和树高3个指标间均未有显著相关性，但叶面积和叶柄长宽比对树冠浓密度有积极影响，且叶宽与胸径间有一定的负相关趋势，与树高间有一定的正相关趋势。

表 4(Table 4)

表 4 乐昌含笑家系叶形态和生长指标的偏相关系数 Table 4 Partial correlation coefficients of leaf morphology and growth indices of Michelia chapensis families L W DW L/W A PL/PW SLA CD DBH H L 1 0.81* –0.19 0.95** 0.87** –0.31 –0.19 –0.18 0.40 –0.39 W 1 0.34 –0.95** 0.88** 0.39 0.30 0.03 –0.68 0.62 DW 1 0.29 0.83* 0.42 –0.99** 0.01 0.39 –0.53 L/W 1 0.01 0.46 0.27 0.04 –0.52 0.49 A 1 –0.41 0.62 0.60 0.21 –0.04 PL/PW 1 0.46 0.67 0.15 0.02 SLA 1 0.05 0.32 –0.48 CD 1 0.63 –0.39 DBH 1 0.91** H 1 **: P < 0.01; *: P < 0.05.

表 4 乐昌含笑家系叶形态和生长指标的偏相关系数 Table 4 Partial correlation coefficients of leaf morphology and growth indices of Michelia chapensis families

对15个家系进行多指标系统的聚类分析，结果表明(图 1)，在阈值为1.00时，可把15个家系分为4个类别。第Ⅰ类家系只有乐两15，其叶面积较小、叶柄细长、叶片短细呈窄倒卵形、树冠浓密且树体高大；第Ⅱ类家系有乐九7、乐两4和乐两6，具有叶面积较小、叶片短宽呈短圆状倒卵形、树冠较稀疏且树体较矮小等特征；第Ⅲ类家系有乐大6和乐两16, 具有叶面积较大、叶片细长呈窄倒卵形、树冠较稀疏且树体矮小等特征；第Ⅳ类家系有乐大1、乐大7、乐九3、乐九4、乐九5、乐两12、乐两14、乐两3A、帽子峰共9个家系，具有叶面积较大、叶片细长呈窄倒卵形、树冠较稀疏但树体较高大等特征。

图 1(Fig. 1)

图 1 乐昌含笑家系的表型聚类图 Fig. 1 Phenotypic dendrogram of Michelia Lechang families

植物叶片的发育由叶原基起始，期间涉及转录因子、小分子RNA及生长调节剂参与的一系列细胞分裂和分化程序，最终发育成形态大小固定的成熟叶^[13]；整个发育过程是植物内因和外部环境因素共同作用的结果，因而即使遗传背景相同，同一株树上也长不出两片完全相同的叶子^[12-14]。由15个乐昌含笑家系叶片形态分析结果可知，叶长、叶宽、叶面积、叶长宽比、比叶面积、叶干物质质量在不同来源地和同一来源地的家系间和家系内均存在明显差异。由此推测，位于同一试验林内的15个家系，其叶片形态发育过程除了受到外部环境因素的影响外，可能更多的是内部遗传因素的调控。由于本试验限于一片家系试验林，今后还应通过多个试验点数据的系统分析，以深入解析乐昌含笑家系叶形态发育与环境的互作效应。

叶的基本功能是光合作用和蒸腾作用^[15]，叶面积越大，叶片对光的吸收量得到增强，叶片的光合效率提高，对植株接收和利用光能有重要意义^[16]。蔡锡安等研究表明，低光下梅叶冬青(Ilex asprella)的叶厚度变小，而叶长、叶宽、比叶面积及单叶面积明显增大，并指出叶片形态结构的改变是梅叶冬青对低光的一种适应策略^[17]。乐昌含笑属于喜光树种，在温暖、湿润、土壤肥沃、阳光充足的环境中生长良好^[18]。本研究对15个乐昌含笑家系的10个形态和生长指标的相关性分析表明，叶宽与胸径间呈现出较密切的负相关趋势，与树高呈正相关关系(表 4)，即叶片越宽，植株高生长可能越明显，胸径生长则越小。这可能也暗示了试验林中存在着较激烈的个体竞争，为了获取更好的光照条件，植株更趋于向上层空间伸展。

乐昌含笑是兼具景观和用材特性的优良乡土阔叶树种，基于多个指标的聚类分析结果，可对15个乐昌含笑家系进行合理应用，对于第Ⅰ类家系的乐两15, 第Ⅳ类家系的乐大1、乐大7、乐九3、乐九4、乐九5、乐两12、乐两14、乐两3A、帽子峰等，可在林业生态建设和城市园林景观建设中应用。第Ⅰ类家系乐两15具有树体高大、树冠浓密等特性，尤其适合在城市(道路)绿化美化中单植、列植或群植；第Ⅳ类家系因具有树体高大、树冠较稀疏等特性，可在相似区域的工业用材林基地中应用；对于第Ⅱ、Ⅲ类家系，可作为乐昌含笑基因资源进行适当保存。当然，由于本研究局限于单一地点，今后还应扩展区域试验或适应性试验，以充分了解其形态变异特征，尤其是生长特性和适生性后再大面积的推广应用，以期为乐昌含笑这一优良乡土阔叶树种的合理开发提供科学依据。